【技术方案与应用案例】

一、产品介绍

南京赛泓瑞生物科技有限公司提供的永生化小鼠肝枯否细胞（Kupffer细胞）是一种卓越的体外模型，广泛应用于肝脏炎症反应及各类肝脏疾病的病理机制研究。以下是我们基于该产品进行的一项应用案例的分享。

二、实验方法

我们从南京赛泓瑞生物科技有限公司获取的永生化小鼠肝枯否细胞被置于含有10%胎牛血清及1%青霉素/链霉素的DMEM培养基中，在37°C、5% CO₂的培养箱中进行培养。当细胞生长到80-90%汇合时，使用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液进行消化，随后按照1:4的比例进行传代。实验中所用药物溶解于DMSO中，制备成不同浓度的储存液并存放于-20°C。

我们将细胞接种于96孔板，每孔约接种5×10³个细胞。经过24小时后，更换培养基，加入含有不同浓度药物的新鲜培养基。药物处理分为对照组（仅含DMSO）与实验组（不同浓度药物），每组设有6个复孔。药物处理24小时后，向每孔中添加20µL的5mg/mL MTT溶液，再将细胞在培养箱中继续培养4小时。随后，移去MTT溶液，并在每孔中加入150µL DMSO，震荡10分钟以溶解甲臜晶体。使用酶标仪在570nm波长下测量吸光度（OD值）。药物处理结束后，收集细胞培养上清液，并依据ELISA试剂盒说明书检测上清液中TNF-α与IL-6的含量。数据分析使用GraphPad Prism软件完成，组间比较采用单因素方差分析（ANOVA）后进行Tukey's多重比较检验。所有数据结果以平均值±标准差（SD）表示，P值小于0.05被认为具有统计学意义。所有实验均至少重复三次，以确保结果的可靠性。

三、实验结果

我们的实验结果显示，与对照组相比，实验组中的药物处理的永生化小鼠肝枯否细胞显示出显著降低的细胞活力（P<0.05）及增加的TNF-α和IL-6水平（P<0.05），表明该药物具有潜在的抗炎作用。

四、结语

南京赛泓瑞生物科技有限公司的永生化小鼠肝枯否细胞为肝脏炎症研究提供了稳定而可靠的实验工具。我们的应用案例展示了该产品在药物筛选及炎症机制研究中的重要价值。期待与广大的科研工作者携手，共同推动肝脏疾病研究领域的发展，助力PG电子品牌在生物医疗领域的创新。